关于这方面影响，目前还没有明确的共识。几个潜在的危险因素包括：男性因素、输卵管因素、子宫内膜异位症、多囊卵巢综合征等。在研究试管婴儿授精方法对单卵双胎率的影响时，应考虑以下几个方面。首先，透明带操作，包括ICSI、PGD、或辅助生殖过程中对透明带的物理性破坏；此外，新鲜或冷冻胚胎移植对透明带的影响。另一些研究发现，ICSI与IVF相比，单羊膜囊双胎风险增加2.42倍，这可能与透明带操作相关。同时也有研究认为冷冻或新鲜胚胎移植相比较，发现使用新鲜胚胎移植有着更高的单卵双胎发生率。
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